产品货号:
GS0131
中文名称:
BL21(DE3)感受态细胞
英文名称:
BL21(DE3)Competent Cells
产品规格:
5×100μL|10×100μL|100×100μL
发货周期:
1~3天
产品价格:
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BL21(DE3)化学感受态细胞经特殊工艺制作,可用于DNA的化学转化。使用pUC19质粒DNA检测,转化效率高达107 cfu/μg DNA。该菌株用于T7 RNA聚合酶为表达系统的高效外源基因的蛋白表达宿主,T7噬菌体RNA聚合酶基因的表达受控于λ噬菌体DE3区的lacUV5启动子,该区整合于BL21的染色体上。该菌株适合于非毒性蛋白的表达。
组分 | 5×100μL | 10×100μL | 100×100μL |
BL21(DE3)感受态细胞 | 5×100μL | 10×100μL | 100×100μL |
说明书 | 1份 |
保存:-80℃,有效期6个月。
基因型:
F- ompT hsdSB(rB- mB-) gal dcm(DE3)
- 使用1ng的质粒DNA进行转化时:100μL E.coli BL21(DE3) Competent Cells/1ng pUC19 Plasmid进行转化时产生的菌落数>1×106 transformants/1μg pUC19 Plasmid。
- 100μL的E.coli BL21(DE3) Competent Cells在含有100μg/mL Ampicillin的L-琼脂平板培养基上过夜培养40 hr不产生菌落。
- 感受态细胞一定要用干冰运输。感受态细胞应在-80℃下保存,不可多次冻融和放置时间过长,以免降低感受态细胞的转化效率。
- 所有步骤均在无菌条件下操作。
- 不适合在液氮中保存。
- 从-80℃冰箱内取出BL21(DE3) Competent Cells,迅速插入冰盒内,使其溶解。
- 加入DNA样品轻轻混匀,冰中放置30分钟。
- 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰中放置2分钟左右,注意不要晃动。添加700μL不含抗生素的无菌培养基,混合均匀。
- 37℃振荡培养1小时(160~225rpm),吸取适量体积均匀涂布到含相应抗生素的LB琼脂培养基平板中。37℃正置至液体被吸收,然后倒置过夜培养。
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